訂購信息：
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目錄號 |
產品名稱 |
規格 |
售價 |
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X12040 |
DAPI (5mg/ml) DAPI染液（5mg/ml） |
200μl |
￥255.00 |
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X12041 |
DAPI Stain, Ready-to-use 即用型 DAPI染液 |
10ml |
￥194.00 |
產品說明：
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CAS號 |
28718-90-3 |
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分子式 |
C16H17Cl2N5·2HCl |
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分子量 |
350.25 g/mol |
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保存 |
-20℃保存，一年有效 |
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運輸 |
冰袋運輸 |
產品描述
DDAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種常用的核酸染料，可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合，產生比自身強20多倍的藍色熒光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對RNA進行染色，染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有較長的最大發射波長(500 nm)，其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。
盡管DAPI不能通過活細胞膜，但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色體DNA。
DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術，因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域，其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。
本產品為溶液，分為2種形式，濃度為5 mg/mL和即用型，即用型產品濃度已經過優化，可以滿足各種常規染色的需要。
使用方法
1. 配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10 μg/mL）。【注：即用型不需要此操作】
2. 固定的細胞或組織染色：
對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI 染色。
a) 對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。
b) 對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c) 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm，發射波長460 nm。
3. 活細胞或組織染色：
a) 細胞培養物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
b) 在37℃培養細胞 10～20 分鐘。
c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm，發射波長460 nm。
注意事項：
1）DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。
2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。
3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4）低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。
5）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應用或其他用途。
