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特性說明：

產(chǎn)品描述：

線性化聚乙烯亞胺PEI 25, 000,一種高電荷陽離子聚合物，非常容易結(jié)合于高電荷陰離子基質(zhì)。工業(yè)應(yīng)用上，線性化PEI可改善負(fù)電荷染料的物理外觀，以調(diào)整染料的化學(xué)特性和增強(qiáng)染料與固相基質(zhì)的黏附能力，常用作黏附增強(qiáng)劑，作用同多聚賴氨酸(poly-lysine) ；科研應(yīng)用上,線性化PEI能與DNA或其他負(fù)電荷生物大分子簡(jiǎn)單結(jié)合，正是這一特性，使得其成為一種非常行之有效的載體運(yùn)輸介質(zhì)(Vector carrier)，即轉(zhuǎn)染試劑。

在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中，PEI在寬廣的生產(chǎn)規(guī)模內(nèi)(從96孔板到100L生物反應(yīng)器) 能提供連續(xù)性的高基因表達(dá)。

儲(chǔ)存液配制

1) 于1L玻璃燒杯，將1g PEI25K粉末加入900ml Milli-Q? 超純水或其他相當(dāng)級(jí)別的生物用水中。

2) 將磁性轉(zhuǎn)子放入燒杯內(nèi),打開攪拌模式使產(chǎn)生小型漩渦。邊攪拌邊逐滴加入鹽酸(12M) 調(diào)節(jié)pH,直至pH < 2.0.

3) 蓋住燒杯口，持續(xù)攪拌直至粉末完全溶解(溶解時(shí)間高達(dá)3h)。整個(gè)過程pH <2.0. [注意] :可能會(huì)存在一些小纖維狀顆粒不能溶解，這是正常現(xiàn)象。

4) 邊攪拌邊逐滴加入NaOH (10M) 調(diào)節(jié)pH，直至到6.9-7.1.

5) 將溶液轉(zhuǎn)入量筒內(nèi)，加入水定容到1L，用一次性0.1-0.2μm PES真空過濾器過濾除菌，即得到1mg/ml的儲(chǔ)存液。

6) 根據(jù)單次用量將儲(chǔ)存液分裝，保存在-20°C,高達(dá)1年穩(wěn)定。儲(chǔ)存液再次融化后，可置于4°C保存，高達(dá)2周穩(wěn)定,但絕不可重新凍存。

注意事項(xiàng)：

1、對(duì)于本品的轉(zhuǎn)染方法可參考以下文獻(xiàn)

1）Durocher, Y., Perret, S. & Kamen, A. High-level and high-throughput recombinant protein production by transient transfection of suspension-growing human 293-EBNA1 cells. Nucleic acids research 30, E9 (2002).

2）Thomas M, Lu J, Ge Q, Zhang C, Chen J, Klibanov AM. (2005). Full deacylation of polyethylenimine dramatically boosts its gene delivery efficiency and specificity to mouse lung. Proc Natl Acad Sci U S A.102(16):5679-84.

3 ) Wulhfard, S., Baldi, L, Hacker, D. L & Wurm, F. Valproic acid enhances recombinant mRNA and protein levels in transiently transfected Chinese hamster ovary cells. Journal of Biotechnology 148, 128 -132 (2010).

4）Baranyi, L. et al. Rapid Generation of Stable Cell Lines Expressing High Levels of Erythropoietin, Factor VII, and an Antihuman CD20 Antibody Using Lentiviral Vectors. Human Gene Therapy Methods 24, 214- -227 (2013).

2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

本產(chǎn)品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應(yīng)用或其他用途。